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富血小板血浆对不同条件下人牙周膜成纤维细胞功能的影响

施六霞

  目的:本研究拟讨论富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)对人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblasts,HPDLFs)增殖和迁移能力以及与人骨髓基质细胞(human bone marrow stroma cells,HBMSCs)共培养下的细胞增殖能力的影响,为PRP在牙周组织再生治疗中的应用提供实验数据。 方法: 1.采用组织块培养法体外分离培养人PDLFs,检测波形丝蛋白的表达,以确定其生物学来源;采用全骨髓培养法分离培养人骨髓基质细胞;PRP由江苏省血液中心提供。 2、采用MTT法检测不同浓度PRP(1%,5%,10%,,20%,30%,50%)对PDLF增殖能力的影响;transwell系统测定不同浓度PRP(1%,5%,10%,,20%,30%,50%)对HPDLFs迁移效果,无血清培养液为阴性对照,10%新生小牛血清为阳性对照。 3.将HPDLFs和HBMSCs按1:1接种至transwell系统中,不同浓度PRP(5%,10%,20%,30%,50%)分别加入transwell中,无血清培养液为阴性对照,10%新生小牛血清为阳性对照,另设PDLFs细胞单独培养为共培养的阴性对照,培养7天进行MTT测定。 结果: 1.通过组织块法分离培养的HPDLFs表达波形丝蛋白,属于中胚层来源的细胞;通过全骨髓培养法分离培养人骨髓基质细胞呈成纤维细胞样的外观,在体外具有良好的增殖能力。 2. 3d、5d和7d时,各浓度PRP组与阴性对照组比较细胞量均显著增高(P<0.01),以20%浓度组最佳(P<0.01);各浓度PRP组在7天的培养期内均显示明显的时间依赖性。 与阴性对照相比,不同浓度的PRP均能明显促进细胞迁移(P<0.01),以10%的浓度组PRP效果(91.80±2.39)最佳(P<0.01)。 3. 7天时,各浓度PRP组的细胞量均显著高于阴性共培养对照组和阴性单独培养对照组(P<0.01);并且共培养组比单独培养增殖组增殖能力强(P<0.01);以10%PRP浓度组最佳(P<0.01)。 结论:PRP能促进人牙周膜成纤维细胞的迁移和增殖,对与骨髓基质细胞共培养条件下,PRP对人牙周膜成纤维细胞的增殖促进效果最佳。……   
[关键词]:牙周膜成纤维细胞;骨髓基质细胞;富血小板血浆;共培养
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:南京医科大学2010年