手机知网 App
24小时专家级知识服务
打 开
手机知网|搜索

轻度维生素A缺乏对大鼠肺形态发育及血小板源性生长因子-A表达影响的研究

许春阳

  目的 观察轻度维生素A缺乏(MVAD)对不同时期大鼠肺发育的形态学结构以及血小板源性生长因子A(PDGF-A)基因和蛋白表达的影响。 方法 24只SD雌鼠随机分为MVAD组和对照组。建立MVAD孕鼠模型,取孕16d、20d、生后1d MVAD组和正常对照组胎/幼鼠肺脏,做石蜡切片和电镜切片,石蜡切片予HE染色、Masson氏三色染色和地衣红染色,光镜和电镜观察肺脏形态及胶原纤维、弹力纤维的改变。RT-PCR方法检测各组肺PDGF-A基因mRNA的表达,免疫组织化学方法检测PDGF-A蛋白水平的表达。比较MVAD组和正常对照组大鼠肺发育的形态学结构和PDGF-A表达的区别。 结果 1. HE染色显示:16d MVAD组支气管圆形管腔较对照组分支样管腔幼稚;20d MVAD组较对照组原始肺泡少,平均肺泡表面积较小,肺泡间隔较厚(P<0.01);生后1d MVAD组表现为肺发育的不均一性:较多区域有肺泡过度膨胀,肺泡间隔较薄(P<0.01),有离断;局部又有肺泡膨胀不全,间质充血,肺泡间隔增厚。 2. Masson氏三色染色显示:MVAD组胶原纤维同倍镜下面积较少,胶原纤维纤细疏松(P<0.01)。 3.地衣红染色显示:MVAD组较对照组肺泡气管壁弹性纤维分布稀疏,染色浅;血管壁弹性纤维纤细,局部紊乱、断裂。 4.电镜显示:16d MVAD组较对照组上皮细胞排列疏松,细胞间有空泡,绒毛结构较少;20d和生后1d MVAD组显示Ⅱ型肺泡上皮细胞内板层小体较少,结构紊乱,线粒体结构欠清晰,上皮细胞微绒毛较短。 5. RT-PCR结果:MVAD组的PDGF-A基因的mRNA表达量明显低于对照组(P<0.01)。 6.免疫组织化学结果:生后1d幼鼠肺组织支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞、血管内皮细胞内均可见PDGF-A蛋白表达。其中MVAD组PDGF-A蛋白表达量较对照组少(P<0.01)。 结论 1.维生素A在肺发育中起着重要作用,MVAD会导致大鼠的肺脏发育不全。 2. MVAD可致出生前的肺脏发育幼稚,出生后出现不均一的肺不张及肺气肿表现,这与Ⅱ型肺泡上皮细胞的发育不良,弹性纤维和胶原纤维的缺乏有关。 3. MVAD引起PDGF-A的表达减少,可能是大鼠肺发育障碍的原因之一。……   
[关键词]:轻度维生素A缺乏;胚胎;肺发育;形态学;血小板源性生长因子-A
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:南京医科大学2009年