手机知网 App
24小时专家级知识服务
打 开
手机知网|搜索

高效产胞外酶菌株的筛选及其对鱼塘水体有机N、P的转化作用

鲜莹

   随着水产养殖业的迅猛发展,水体环境恶化问题日趋严重,渐渐成为限制水产养殖发展的要素。为了寻找改良水质的新方法,本试验以从自然界筛选具有高效产胞外酶能力、并且能够有效消除水体中有机物质的菌株为主要目的和研究意义。 采集渔-稻复合系统中水稻根际的淤泥和鱼塘的底泥,制备成土壤稀释液。经过涂布分离培养后,得到形态不同的菌落。 利用微板法和蛋白酶筛选培养基分别筛选出产胞外碱性磷酸酶和蛋白酶的菌株,再分别通过酶活力测定对所选菌株进行复筛。磷酸苯二钠法测定碱性磷酸酶活力,福林酚法测定蛋白酶活力。 通过初筛和复筛筛选出有较强产胞外碱性磷酸酶和蛋白酶能力的菌株,扩增培养后,将其所产酶液加入富营养水体中以研究胞外酶对水体中有机磷和有机氮的去除,及其对水体中磷元素和氮元素的影响。研究结果如下: (1)筛选出四株高效产胞外碱性磷酸酶菌株(R1,R3,R4和P3);相对于对照组而言,四株菌株对水体的有机磷转化效率分别达到55.09%,36.36%,52.62%和54.23%。 (2)筛选出两株高效产蛋白酶菌株(PRO1和PRO9);两株菌株所产的蛋白酶能够催化水体中的氨化反应,减少水体有机氮含量。 在试验中发现一株既能产磷酸酶又能产蛋白酶的菌株R1 (PRO9),对其生长产酶条件进行研究后,得到以下结果: (1)在培养过程中,R1 (PRO9)菌株所产的胞外碱性磷酸酶活性随着菌株的数量增多而增强,而蛋白酶则在培养36h取得较高酶活性后,不再随菌体数量呈现上增趋势。 (2) R1 (PRO9)菌株产碱性磷酸酶的最适温度为37℃-47℃,而其所产的蛋白酶在67℃高温下保持较高的酶活力水平。 (3) R1 (PRO9)菌株产碱性磷酸酶的最适pH为8-10,而产蛋白酶的最适pH为7,可见其所产的蛋白酶是一种中性蛋白酶。 本试验筛选出的有较强产胞外酶能力的菌株,可用于转化水体中的有机物质,对改善养殖水体富营养化有一定的作用,具有较大的研究前景。……   
[关键词]:养殖水体;胞外碱性磷酸酶;胞外蛋白酶;有机磷;有机氮;水质改良
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:华中农业大学2010年