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饲料中展青霉素测定方法及其在饲料中污染情况的研究

吴婉瑛

   展青霉素是多种霉菌产生的次级代谢产物,广泛存在于食品和饲料中,对动物具有多种毒性,包括神经毒性、细胞毒性、遗传毒性等。饲料中展青霉素对动物的危害引起了人们的注意。本研究的目的是建立检测配合饲料和饲料原料中展青霉素含量的高效液相色谱法,并进一步调查我国饲料中展青霉素污染情况,为我国制定相关标准提供技术及数据支持。主要研究结果如下: 高效液相色谱法的建立:将样品粉碎过40目筛后混匀,加乙腈/水(4:1)提取,经离心,取5mL上清液于40℃条件下浓缩近干,加入0.5mL流动相,涡旋混匀,用0.45μm滤膜过滤后上机。使用C18反相色谱柱,在检测波长为276nm,柱温为30℃,进样量20μL,流动相流速为1.0mL/min条件下检测样品,展青霉素保留时间约10min。本试验样品中展青霉素检出限为2.5μg/kg,定量限为8.5μg/kg。展青霉素浓度在0.1~4μg/mL与峰面积呈良好的线性关系,线性方程为y=127793x+854.16,R2=0.9999。苹果渣、麦芽根、DDGS、玉米、次粉、酒糟、配合料、小麦和米糠在添加50μg/kg展青霉素后回收率为66.2%~89.4%,平均为73.8%;添加250μg/kg展青霉素后回收率为76.1%~92.7%,平均为82.9%;添加500μg/kg展青霉素后回收率为83.3%~97.7%,平均为90.0%。平行间变异系数为5.0%~10.1%。用展青霉素含量不同的3个样品进行精密度试验,结果平行间变异为6.3%~12.2%,重现性变异为6.7%~10.4%。三个水平再现性的变异系数分别为9.5%,6.9%,5.5%。 饲料中展青霉素含量测定结果:采集了154个饲料及原料样,用高效液相色谱法检测了其中展青霉素的含量。所有样品PAT检出率为32.4%,平均含量为152.3μg/kg。玉米、玉米蛋白粉、玉米皮、麦类籽实、面粉、白酒糟未检出。苹果渣检出率最高,为90.9%;其次是麸皮、麦芽根和啤酒糟分别为80.0%、75.0%和75.0%;配合料检出率20.4%。检出率最高的苹果渣检出水平并不是最高,检出范围为50.1~482.9μg/kg,平均含量为173.3μg/kg。而DDGS平均含量最高,为514.9μg/kg,检出范围为545.4~1636.2μg/kg;其次是米糠,平均含量为232.0μg/kg,检出范围为19.3~1289.0μg/kg。用薄层色谱法进行半定量验证,结果高于薄层色谱法检出限(125μg/kg)的检出样品检出范围与高效液相色谱法检出结果一致。 本研究建立的高效液相色谱法准确,稳定能用于检测饲料中展青霉素。从检测结果可知饲料及原料存在展青霉素的污染,其中苹果渣的检出率和DDGS的检出水平最高,应引起重视并制定相关标准。……   
[关键词]:饲料;展青霉素;分析方法;高效液相色谱法;污染情况
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:华中农业大学2010年