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微小毛霉凝乳酶基因的克隆及在毕赤酵母中的重组表达

王景会;姜媛媛;李玉秋;李达;杨贞耐

  微小毛霉(Mucor pusillus)凝乳酶是微生物凝乳酶的主要来源之一,但与传统的牛凝乳酶相比,尚具有一定的缺陷。为将其采用基因工程的方法进行改造获得理想的凝乳酶,本研究克隆了微小毛霉凝乳酶基因,构建了酵母表达质粒pPIC9K/M。线性化后电击转化毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,在甲醇诱导下进行凝乳酶的表达,SDS-PAGE分析表明重组凝乳酶的分子量约为47 kD,培养基上清液中凝乳酶的活性为311.8SU/mL。本研究首次应用毕赤酵母表达微小毛霉凝乳酶,在培养基中获得分泌表达的重组凝乳酶。……   
[关键词]:凝乳酶;分泌表达;毕赤酵母
[文献类型]:会议论文
[文献出处]: 《首届中国奶业大会论文集(下册)2010年