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肺炎克雷伯菌质粒介导的碳青霉烯酶KPC-2

张幸国;杜小幸;张嵘;魏泽庆;俞云松;陈亚岗;李兰娟

  目的研究亚胺培南耐药肺炎克雷伯菌的耐药机理。方法采用Etest法测定细菌对各抗菌药物最低抑菡浓度(MIC)。通过等电点分析(IEF)、质粒抽提、接合试验、转化试验、PCR扩增及耐药基因克隆测序分析细菌编码的β-内酰胺酶。结果临床分离的肺炎克雷伯菌等电点显示三条β-内酰胺酶条带,分别为5.4、6.7和8.2。PCR扩增测序临床分离菌含TEM-1(pI,5.4)、SHV-12 (pI,8.2)和KPC-2(pI,6.7)β-内酰胺酶编码基因。转化菌只有一条β-内酰胺酶条带,为6.7.从转化菌质粒(60kb)上获得1.5kb的克隆片段,测序证实其为KPC-2编码基因。结论亚胺培南耐药肺炎克雷伯菌的质粒上携带水解碳青霉烯类抗生素的A类2f组KPC-2酶的编码基因。……