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用于耐药肿瘤细胞代谢组学的细胞内核苷类组分离子对色谱分析法

赵筱萍;朱狄峰;程翼宇

  目的:建立测定K562及K562/A细胞内核苷类代谢物含量的高效液相色谱法,用于两者代谢组学研究.方法:采用1.2m01.L-1 HCIO4沉淀蛋白,用苯硼酸柱进行固相萃取富集样品中的核苷酸.色谱柱为汉邦C18(4.6×250mm,5μm),流动相由两种缓冲液组成,用梯度洗脱,流速为0.8 ml.min-1。A相缓冲液含10m mol.L-1四丁基氢氧化铵,10m mol.L-1 KH2PO4及0.25%甲醇, pH7.0;B相缓冲液含5.6m mol.L-1四丁基氢氧化铵,50mM KH2PO4及30%甲醇,pH7.0.柱温25℃, 检测波长260nm.结果:各种核苷类代谢物分离良好,内源性物质无干扰,K562及K562/A细胞内核苷类代谢物平均回收率分别为88.3-109.2%、84.5-115.6%.结论:该法简便及重现性好, 可同时测定肿瘤细胞中核苷、单核苷酸、二核苷酸及三核苷酸含量.分析结果表明,K562与K562/A 细胞核苷类代谢物组存在明显差异.……   
[关键词]:代谢组学;K562/A;核苷;核苷酸;RP-HPLC
[文献类型]:会议论文
[文献出处]: 《浙江省生物化学与分子生物学学术交流会论文集2005年
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