手机知网 App
24小时专家级知识服务
打 开
手机知网|搜索

离子阱串级质谱构建家蚕蛹小肽库初探

王江;任小元;孔祥东;陈健;张耀洲

  我们利用ABI公司所产的离子阱串级质谱(Q-TRAP MS/MS)初步构建了家蚕蛹5000Da 以下小分子肽库:阳离子模式下,EMS、EMC扫描条件为Curtain Gas(CUR):10.0,Collision Gas(CAD):High,Ionspray Votage(IS):5500,ion source Gas 1(GS 1):20;Declustering Potential(DP):30.0V,Entrance Potential(EP):10.0V,Collision Energy(CE):10.0eV; 质荷比(m/z)采集范围为200-1700amu.EPI扫描模式条件为Curtain Gas:15.0,Collision Gas: High,Ionspray Votage:5500;ion source Gas 1(Gas 1):20:Declustering Potential (DP):70.0V,Entrance Potential(EP):10.0V,Collision Energy(CE):40.0eV;质荷比(m/z)采集范围为50-1700amu.通过EMS、EMC和EPI家蚕蛹小分子蛋白扫描图谱我们发现: 同等条件下,EMS扫描图谱的离子信号强度比EMC扫描图谱的离子信号强度高,EMS扫描最大可迭8.0×10’cps信号强度(intensity,cps),EMC最高信号强度仅为1.5×107cps;在家蚕蛹小分子蛋白图谱扫描上,多电荷增强离子扫描(EMC)模式优越于单电荷离子扫描(EMS)模式,可得到更多的在单电荷离子扫描(EMS)模式下不出现的蛋白信号峰,获得更多的多电荷蛋白峰; EMC模式可去除一些在EMS模式下出现的单电荷非蛋白物质干扰,在500-1200质荷比(m/z)范围区域,EMC扫描图谱明显比EMS扫描图谱所获得的谱峰信号强度高。我们选取在EMS和EMC扫描模式下均出现的含较高信号丰度蛋白峰作母离子峰(Precusor),在产物离子扫描模式(EPI) 下进行小分子蛋白氨基酸测序与小分子蛋白的鉴定工作,获得以下初步结果:共选取了102个蛋白信号峰进行了EPI扫描并进行了氨基酸预测序工作,获得1-2个氨基酸序列的为38个,3-8 个氨基酸序列的为40个,8个以上的氨基酸序列为18个,未获得氨基酸序列的为6个。……   
App内打开