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双歧杆菌及其WPG对脐血来源DC分化成熟的影响

程茜;聂晶

  目的:研究两歧杆菌和两歧双歧杆菌完整肽聚糖(WPG)对脐血来源树突状细胞(DC)形态及分泌细胞因子的影响,了解双歧杆菌及其WPG对DC分化、成熟及免疫调节功能的作用;并为益生菌及其生物活性成份的进一步开发提供依据。方法:分离正常孕妇脐血单个核细胞诱导生成未成熟树突状细胞(Dendritic cells,DCs),实验组在培养的第7天分别加入两歧双歧杆菌全菌(100μg/ml)、两歧双歧杆菌WPG(5μg/ml),阳性对照组加入脂多糖(LPS),阴性对照组仅加入培养基。倒置显微镜在培养各期形态学观察,流式细胞术检测表面标志物CD83及CD1a的表达,MLR检测DCs刺激同种异体T淋巴细胞能力,ELISA法测定DCs培养上清中IL-12p70、IL-10的分泌。结果:脐血单核细胞在双歧杆菌或其WPG与GM-CSF、IL-4协同诱导作用下,能成为形态上具有典型树突状突起的DCs;诱导后的CB-MDDCs刺激同种异体T细胞的增殖能力及分泌IL—12p70、IL—10的水平显著高于阴性对照组(P<0.01)且细胞表面标志物CD83及CD1a的表达增加。结论:1双歧杆菌及其WPG能影响CB-MDDCs的成熟状态;2双歧杆菌WPG对CB-MDDCs成熟程度及分泌细胞因子水平的影响强于双歧杆菌全菌,说明WPG是双歧杆菌主要免疫活性成分。……