手机知网 App
24小时专家级知识服务
打 开
手机知网|搜索

小花棘豆苦马豆素毒性相关相内生真菌的研究

卢萍;Dale Gardener;Dennis Child;赵萌莉;韩国栋

  小花棘豆(Oxytropis glabra DC.)是内蒙古草原一种重要的疯草植物,许多植株含抑制动物细胞内甘露糖苷酶的苦马豆素。美国学者从疯草 O.lambertii、O.sericea 和 A.mollisimus 中分离出内生真菌 Embellisia sp.L12,提出疯草苦马豆素毒性与内生真菌有关。本研究将植物化学、分子遗传学和经典微生物学的理论和研究方法相结合,探索小花棘豆中是否存在内生真菌,研究苦马豆素是否与其内生真菌相关。首次用 LC-MS2法测定了小花棘豆6个种群90个单株的苦马豆素含量;对小花棘豆单株进行了体外真菌培养。研究了其微生物学特性;从植物总 DNA 和同株培养的真菌菌丝体总 DNA 中扩增出真菌5.8SrDNA/ITS 区, 进行了 DNA 序列分析与排序。综合小花棘豆苦马豆素含量测定和内生真菌 DNA 序列分析结果, 并与内生真菌 Embellisia sp.L12了比较。首次在一些小花棘豆中发现内生真菌,且植物含苦马豆素与其有内生真菌相对应,体外培养的内生真菌生长缓慢,呈圆形、隆起、边缘整齐和辐射状生长的白色菌落,分生孢子近圆柱形,有粗且比孢子壁厚的暗色横隔膜,具有 Embellisia 真菌的特征。10株苦马豆素禽量较高的小花棘豆内生真菌的5.8S rDNA/ITS 序列相同,与 Embellisia sp.L12相比,序列总长为517 bp,其中 ITS1为199bp,ITS2为148bp, 5.8SrDNA 为170bp,有一个变异位点在5.8SrDNA 基因区的第227位,在中国内蒙古的10个序列里为 T,在 Embellisia sp.L12菌株序列里为 A。推测该内生真菌属于 Embellisia,其物种鉴定需深入研究。……