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牛病毒性腹泻病毒RT-PCR方法的建立及应用

陈云霞;侯韶毅;卢桂娟;陆有飞;高永锐;王成业;黄伟坚

  根据牛病毒性度泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)代表株NADL的NS5B基因序列,设计合成2对引物进行套式PCR,利用该方法扩增出360bp的特异性片段,通过对此特异性片段的克隆,序列测定以及计算机系统分析证实,该片段的基因序列与BVDVⅠ代表株有94%的同源性.应用该方法检测了某生物制品厂提供的6份样品(血清、细胞等),其中2份为阳性.试验表明,该方法可以用做BVDV快速检测的方法,并证实了生物制品生产中常用的细胞和血清已经存在着BVDV的污染.所以生物制品生产过程中的材料以及制成品进行BVDV的检测是排除其BVDV污染的一个重要手段,也是非常重要的.……