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猪圆环病毒2型灭活疫苗的研制

刘长明;危艳武

  猪圆环病毒2型(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的重要病原,以进行性消瘦、咳嗽、呼吸困难、腹泻、皮肤苍白、淋巴结肿大、肾脏灰白水肿为主要特征,给养猪业造成了巨大的经济损失。此外,猪皮炎与肾炎综合征(PNDS)、猪繁殖障碍(PRF)、猪呼吸道疾病复合征(PRDC)、猪的间质性肺炎及先天性震颤(CT)等疾病也与PCV2感染相关,现统称为猪圆环病毒病(PCVD)。在PCV2疫苗研制过程中,遇到的主要问题有:该病毒体外繁殖能力差,培养物病毒含量低;病毒接种细胞不产生病变,病毒含量不易测定;病毒感染动物临床反应不一,免疫效力评价困难。本研究采用临床分离的PCV2毒株,通过细胞培养传代,获得细胞培养适应毒株,病毒繁殖能力也随病毒传代毒价显著提高,实验室制备了5批次病毒液滴度达10~(5.9-6.3)TCID50/ml,具备了疫苗种毒的条件。按现行《中国兽药典》标准对疫苗毒种进行了细菌、霉菌、支原体及其他外源病毒检验均符合规定要求。PCV2培养液经甲醛灭活后,用5种佐剂乳化制备灭活疫苗,经动物免疫试验比较确定了疫苗制造规程。用实验室制备的5批次疫苗对本动物进行了单剂量、单剂量重复和大剂量安全性试验,证明疫苗安全性良好,无毒副作用。用本动物进行的攻毒试验结果表明,该疫苗免疫保护率达96%。该疫苗主要用于预防PCV2感染引起的断奶仔猪多系统衰竭综合征,适用于3周龄以上猪只使用。免疫程序为仔猪断奶前1周进行首次免疫,间隔3周加强免疫1次,剂量均1ml/头;成猪每半年免疫1次,剂量为2ml/头;母猪配种前免疫1次,产前20日加强免疫1次,剂量均为2ml/头。该疫苗于2-8℃下保存,有效期为12个月,免疫持续期为6个月。目前该疫苗已完成实验室研究,进入临床试验阶段。……