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鸡CD3分子单克隆抗体及其免疫生物学特性

张小燕;潘志明;胡青海;胡茂志;孙林;李玉君;董慧;单艳菊;张成全;白海;焦新安

  研制抗鸡 CD3分子特异性单克隆抗体(mAb)。用重组真核表达质粒 pcD- NA3.1-CD3免疫6周龄 BALB/c 小鼠,应用淋巴细胞杂交瘤技术,制备抗鸡 CD3分子 mAb。共获得7株特异性分泌抗鸡 CD3分子的 mAb,分别命名为1A10、3E3、3G10、 5F3、8D1、9E7和15A11,mAb 腹水 ELISA 效价在1:3200~1:25600,间接免疫荧光(IFA)效价在1:800~1:6400之间,其中除15A11为 IgG2a 亚类外,其余均为 IgM 亚类。mAb 反应谱测定结果显示,9E7、5F3和3E3与所试验的8个品种鸡的脾脏淋巴细胞均能反应,其他 mAb 与这些品种鸡的脾脏淋巴细胞反应不一。重组质粒 pcD— NA3.1-CD3转染 COS-7细胞,以上述 mAb 检测表达产物结果表明,所有 mAb 均能与表达产物反应。FACS 分析结果显示,9E7和5F3出现了较明显的阳性峰。本研究所制备的抗鸡 CD3分子 mAb 为鸡细胞免疫应答的检测与分析提供了良好的生物材料。……