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牛BMP4基因3′末端序列克隆与分析

王峰;刘永斌;荣威恒

  BMP4基因主要在动物早期胚胎中表达,是与哺乳动物身体形态的形成有重要关联的基因。本文参考人和老鼠BMP4基因序列信息,设计上下游引物,扩增牛的BMP4基因部分cDNA序列,根据此序列设计特异引物。从牛软骨中快速抽体总RNA,以此RNA为模板,经RACE法获得特异片段,并将该片段克隆到PMD18-T载体中,转化大肠杆菌感受态细胞Ecoli DH5a。将含有外源片段的克隆质粒经PCR、酶切和测序验证,获得了牛BMP4 3端的序列并进行序列分析。结果表明,牛BMP4基因与禽类和哺乳类动物的保守性非常高(70%以上),其中与羊的保守性最高,达到94%。……