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柑橘黄化脉明病毒胶体金免疫层析检测试纸条的研制

宾羽;宋震;李中安;周常勇

  柑橘黄脉病是由柑橘黄化脉明病毒(Citrus yellow vein clearing virus,CYVCV)引起的一种新发柑橘病毒病,随着该病的发生范围不断扩大,给柠檬产业带来极大损失。为更快速、简便地检测CYVCV,对其进行有效的监测防治,本试验对CYVCV胶体金免疫层析检测试纸条进行研制和评估。选择30nm胶体金标记CYVCV单克隆抗体(1E1),将羊抗鼠IgG和1E1包被在硝酸纤维素膜上,分别作为质控线(C)和检测线(T),试纸条组装后对其进行评估。结果显示,该试纸条与柑橘衰退病病毒(Citrus tristeza virus,CTV)等8种柑橘常见病原物无交叉反应,特异性强;样品检测的最低稀释限度为1:320[W/V,叶片组织重(g)/缓冲液(mL)],灵敏度与dot-ELISA相当;检测结果于加样后5~10min即可获得。本实验研制的CYVCV胶体金免疫层析检测试纸条具有特异性强、快速、简便、低成本等优点,可推广用于田间柑橘黄脉病早期快速检测,进而指导病害防治。……