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白细胞介素-18基因修饰大肠癌细胞肿瘤疫苗的制备及抗瘤作用研究

韩明勇;刘奇;唐步坚;邓砚;曹明峰

  目的:建立转人白细胞介素-18(hIL-18)基因的大肠癌细胞株SW480细胞,对IL—18基因修饰后的SW480 细胞进行灭活,制备大肠癌基因工程肿瘤疫苗,并对其抗肿瘤作用进行观察。方法:应用MTT法观察X线照射后对大肠癌细胞(SW480细胞)生长的影响血清细胞因子的检测, 实验鼠治疗15天后处死,取血检测血清IFN-γ、IL-2、IL- 12、IL-4、IL-10,采用ELISA法。将SW480细胞和SW480- IL-18细胞应用放射线灭活后接种于裸鼠左侧背部皮下,再接种SW480细胞子裸鼠右侧背部皮下,观察灭活后SW480- IL-18细胞的抗肿瘤效应。结果:经过高能X线照射后, SW480-IL-18细胞生长停滞,到第96小时,全部SWIL-18- 480细胞死亡。ELISA检测结果显示,未照射的106个SW48- IL-18细胞在24小时内分泌IL-18的含量是182.7 pg,照射的106个SW48-IL-18细胞在24小时内分泌IL-18的含量是 60.39 pg。空载体转染的SW480细胞和未转染的SW480细胞上清液中未检测到IL-18。SW480-IL-18组与SW480组和 pcDNA3.1/SW480组比较(P<0.01),能明显刺激T细胞增殖,而SW480组和pcDNA3.1/SW480组比较对T细胞的刺激作用无明显差别(P>0.05),对T细胞的刺激作用微弱。灭活SW480-IL-18细胞能有效地激活裸小鼠体内NK细胞活性。 SW480-IL-18细胞治疗后,治疗组肿瘤生长明显受到抑制,与其他对照组差别显著(P<0.05)。治疗组小鼠存活期显著延长,有33.35%小鼠长期存活,与其他对照组差别显著(P<0.05)。结论:IL-18基因修饰的SW480细胞具有明显的抗肿瘤作用,为大肠癌基因工程肿瘤疫苗的研制提供了实验基础。……