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海南产芋螺粗毒的提取和纯化

朱晓鹏;吴勇;陈心;王蕊;长孙东亭;罗素兰

  目的意义:通过对海南产5个不同种类芋螺(织锦、菖蒲、独特、疣缟、桶型)毒管、毒腺蛋白成分的分析,对芋螺的粗毒进行纯化和鉴定,并研究芋螺产生毒素的部位,对芋螺毒素的产生和加工机制进行探讨。材料和方法:(1)取新鲜解剖的芋螺毒管和毒腺标本,将毒管内的毒液挤出,并利用B_(50)(50%的乙腈溶液)清洗毒管,收集毒液和清洗液,作为样品1。(2)用B50清洗经过步骤1处理的毒管和毒腺,冰上超声,离心后,保留上清。毒管超声后样品作为样品2,毒腺处理后样品作为样品3。对5种芋螺三类不同的样品进行SDS-PAGE电泳检测。(3)利用Bio-Rad凝胶洗脱装置对凝胶中分子量小于14.4kD的目的蛋白进行回收。(4)利用RP-HPLC对回收的小分子毒素蛋白进行进一步分离纯化和鉴定。结果:小分子的毒素蛋白,主要分布在毒管内,但在毒腺内也存在少量小分子蛋白。利用RP-HPLC,从毒液当中可分离得到20多个主要小分子蛋白。有关这些蛋白的活性还有待进一步验证。结论:(1)利用这种方法可以分离纯化小分子毒素蛋白,以对其活性进行研究;(2)推测芋螺毒素蛋白主要是由毒管细胞产生并分泌到毒管外的,毒腺起到泵的作用,通过毒腺的收缩,把毒素通过毒管和齿舌分泌到猎物体内,发挥作用。……   
[关键词]:毒素;纯化;电泳;RP-HPLC
[文献类型]:会议论文
[文献出处]: 《第九届中国生物毒素学术研讨会论文摘要2009年