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哺乳动物内耳再生毛细胞前体细胞来源的研究

刘俊;赵荣祥;丛品;洪钱江

  目的:探讨哺乳动物内耳再生毛细胞前体细胞的可能来源。方法:取出生1天(Postnatal day1,P1)大鼠的椭圆囊,嗜热菌蛋白酶(thermolysin)处理,消化法进行原代培养。在倒置显微镜下,对椭圆囊感觉上皮细胞(utricular sensory epichelial cell,USEC)的形态、生长特征的进行观察;透射电镜、免疫细胞化学检测细胞角蛋白18、波形蛋白等鉴定USEC上皮细胞来源。免疫细胞化学、RT-PCR检测支持细胞标记物p27kipl mRNA及毛细胞的特征性标记物Brn3a、Calretinin及AchRa9、MyosinⅦa mRNA的表达。结果:原代培养的USEC呈扁平、多角形、核大而圆的上皮细胞形态,细胞之间连接紧密,形成单层时呈 铺路石样 外观。可见由数百个USEC包绕液体而成的dome结构。并表达细胞角蛋白和不表达波形蛋白,微绒毛丰富,细胞间连接紧密,提示其上皮起源。原代培养的USEC表达支持细胞标记物p27kipl mRNA及毛细胞的特征性标志物Brn3.a、Calretinin及AchRa9、MyosinⅦa mRNA,表明培养USEC可能来源于支持细胞并具有毛细胞的特性。结论:原代培养的USEC能产生毛细胞样细胞又表达支持细胞标记物,表明其来源为支持细胞。椭圆囊感觉上皮的支持细胞可能为毛细胞再生的前体细胞之一。……