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树枝状聚合物聚酰胺-胺对葛根素在角膜上皮细胞摄取及渗透的影响

曲涛;周绣棣;慕宏杰;魏俊花;孙考祥

  目的考察树枝状聚合物聚酰胺-胺(PAMAM)对葛根素在角膜上皮(HCE)细胞毒性、摄取及渗透的影响,并对G4PAMAM的摄取机制进行研究。方法采用WST-8法,考察了PAMAM短期细胞毒性、延迟细胞毒性以及与葛根素混合物的HCE细胞毒性。建立HCE细胞摄取以及渗透模型,比较了五种不同代数PAMAM对葛根素HCE细胞摄取和渗透的影响。采用流式细胞仪、扫描共聚焦显微镜对G4PAMAM摄取机制进行了初步研究。结果 PAMAM与HCE细胞孵育30、60、90min后显示细胞毒性呈时间、代数依赖关系,洗脱PAMAM后再孵育24h未表现出延迟的细胞毒性。PAMAM和葛根素的混合物未显示HCE细胞毒性。整代PAMAM可以明显促进HCE细胞对葛根素的摄取,且呈现明显的代数、时间依赖关系,半代PAMAM对葛根素HCE细胞摄作用不明显。整代PAMAM可以促进葛根素在HCE细胞的渗透,促进作用依次为G4>G3>G5,半代PAMAM对葛根素的HCE细胞渗透没有影响。流式细胞术和共聚焦显微镜研究结果表明PAMAM主要是被HCE细胞摄取,而不是共轭连接于细胞表面。结论整代PAMAM可促进葛根素在HCE细胞的摄取及渗透。……