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雌激素受体介导的对ERE报告基因转录的配体非依赖性调节作用

唐晓露;倪鑫

  雌激素是重要的甾体类激素,其调节基因转录的机制非常复杂。除了经典作用途径外,雌激素也可通过调节雌激素受体(ER)与其他转录因子之间的蛋白-蛋白相互作用来发挥转录调节作用,或者通过影响其他转录因子的生成或活性而调节基因转录。研究雌激素的非经典作用机制对于深入研究雌激素调节基因转录意义重大。本研究采用磷酸钙瞬时转染法,将完整的ERα和ERβ分别与ERE报告基因共转染入人的绒毛膜癌细胞株(JEG-3)和人的骨肉瘤细胞株(MG-63),再给与不同信号通路阻断剂处理。结果显示:在JEG-3细胞,10~(-6)mol/LPMA通过ERβ可以明显对ERE位点的转录激活作用,这种作用可被PKC的阻断剂G(o|¨)6976阻断,也可以被ERK的阻断剂PD98059阻断。而单独使用PMA、G(o|¨)6976和PD98059通过ERα对ERE位点的转录没有明显的作用,但是PMA与PD98059共同作用时,可抑制ERE基因的转录。在MG-63细胞,PMA、G(o|¨)6976和PD98059通过ERα对ERE位点的基因转录也没有作用,三种药物都可通过ERβ明显抑制ERE报告基因的转录,且PMA的抑制作用不能被G(o|¨)6976和PD98059阻断。这一结果提示:在两种细胞中,PKC通路都能通过ERβ调节ERE基因的转录,ERK通路也参与了这一调节。在JEG-3细胞中,ERα介导的PKC通路可能部分通过ERK来调节ERE基因的转录。在不同的细胞中,由于其参与作用的PKC亚型可能不同,导致调节作用的表现也有所不同。……