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小黄鱼小清蛋白的纯化及性质分析

蔡秋凤;吕家盛;刘光明;王锡昌;曹敏杰

  本研究拟分离纯化小黄鱼小清蛋白,并对其致敏性进行鉴定,为建立鱼类过敏原的研究提供一定的理论基础。通过硫酸铵分级盐析、阴离子交换柱层析和凝胶过滤柱层析从小黄鱼肌肉中纯化得到电泳纯目标蛋白,分子量约为12 kDa。Western blot分析表明纯化的蛋白为小清蛋白。点杂交结果显示,鱼类过敏者血清与纯化的小黄鱼小清蛋白发生特异性反应,证实分离的小黄鱼小清蛋白对人具有致敏性。热稳定性实验表明,小清蛋白对热稳定,且加热后可形成多聚体。双向电泳结果表明,纯化的小清蛋白的等电点约为4.8。消化稳定性实验表明,胃蛋白酶可很快分解小黄鱼小清蛋白,而胰蛋白酶对小黄鱼小清蛋白几乎不分解。……