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陆地棉品种邯208农杆菌介导茎尖转化体系

侯纯纯;尚爱芹;王省芬;李志坤;吴立强;张桂寅;马峙英

  以陆地棉邯208为材料,进行茎尖分生组织再生培养,采用农杆菌介导转化外源基因,研究固化剂、植物生长调节剂和抗生素筛选对茎尖生根和成苗的作用,以及菌液浓度、侵染时间、共培养温度、共培养时间对转化率的影响。结果表明,以phytagel为固化剂,0.1mg.L-1 6-BA+0.1mg.L-1IAA最适于茎尖不定芽的诱导,1/2MSB+0.1mg.L-1 IAA+0.1mg.L-1 NAA诱导生根效果最佳。在75mg.L-1 Kan筛选下,以OD600为0.9的农杆菌菌液侵染25min,22℃共培养48h,外源基因的转化率最高。采用该转化体系将克隆的编码谷胱甘肽S-转移酶的抗黄萎病相关基因GhGST转化邯208,经PCR检测获得了转基因阳性植株。……   
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