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人腮腺液高丰度蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

姜静;孙其飞;高媛;柳晓兰;高建恩;孙启鸿;王松灵

  目的制备人腮腺液高丰度蛋白单克隆抗体并进行鉴定,为日后唾液蛋白质组学研究中去除腮腺液高丰度蛋白奠定基础。方法将腮腺液经超滤法浓缩蛋白后,进行SDS-PAGE分析,切取分子量约为50-65kDa的高丰度蛋白条带,研磨后注射BALB/c小鼠诱导产生免疫应答,采用经典杂交瘤技术制备单克隆抗体,并应用酶联免疫吸附试验(ELISA)、蛋白免疫印记(Western blot) 等方法进行抗体鉴定。结果共制备10株抗腮腺液高丰度蛋白杂交瘤细胞株,蛋白免疫印记试验表明所制备抗体为特异性抗腮腺液高丰度蛋白抗体。制备出了人腮腺液中丰度最高的蛋白——唾液淀粉酶的单克隆抗体,并通过ELISA法得以验证。结论成功制备了抗人腮腺液高丰度蛋白抗体,为下一步抗体应用研究——腮腺液高丰度蛋白的去除奠定基础。……   
[关键词]:腮腺液;高丰度蛋白;单克隆抗体
[文献类型]:会议论文
[文献出处]: 《第三次全国涎腺疾病学术会议论文汇编2006年