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HPV16 L1蛋白在大肠杆菌中的表达、纯化及免疫原性研究

商庆龙;谷鸿喜

  用IPTG诱导目的工程菌pQE31-HPV16L1/M15(pREP4),对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot分析;用表达的L1蛋白免疫BALB/C小鼠得到抗血清后,利用真核源性的VLP粗提物验证小鼠抗血清的特异性。利用 IMAC金属亲和层析柱纯化L1蛋白。SDS-PAGE结果显示表达产物在57ku处有蛋白条带;Western blot结果证实此条带可与HPV16 L1蛋白的单克隆抗体反应;纯化后的L1蛋白也同样保留免疫特异性;小鼠抗血清可与HPV16L1 VLP(病毒样颗粒)发生特异性反应,证实重组表达的L1蛋白具有免疫原性。本实验表明HPV16 L1蛋白在工程菌 M15(pREP4)中高效表达,为研制HPV16预防性基因工程疫苗和感染的诊断试剂提供了物质基础和技术方法。……