手机知网 App
24小时专家级知识服务
打 开
手机知网|搜索

氯化镉诱发肾上腺皮质细胞凋亡及对立早基因c-Fos、c-Myc蛋白表达水平的影响

张波;杨杏芬;林忠宁;魏青;黄俊明;陈壁锋;李文立;杨影;赵敏

  目的:观察氯化镉对豚鼠肾上腺皮质细胞凋亡的影响,并探讨立早基因c-Fos c-Myc在此过程中的可能作用。方法:体外原代培养豚鼠肾上腺皮质细胞,以0μmol/L、12.5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L及200μmol/L氯化镉处理细胞2小时,用AnnexinⅤ-FITC/PI联合染色,流式细胞仪检测细胞凋亡率;处理1小时,提取细胞蛋白质,经SDS-PAGE、Western blot测定c-Fos、c-Myc蛋白表达水平。以100μmol/L氯化镉染毒0.5h、1h、2h、3h及4h检测细胞凋亡率,在染毒15min、30min、60min、90min及120min后测定c-Fos、c-Myc蛋白表达水平。结果:0μmol/L、12.5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L及200μmol/L氯化镉处理细胞2小时,细胞凋亡率分别为:1.99%、14.79%、35.28 %、44.62%、55.91%和73.48%;100μmol/L氯化镉处理细胞0h、0.5h、1h、2h、3h及4h,细胞凋亡率分别为:1.04%、14.70%、33.99%、49.36%、61.57%和71.55%。12.5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L及200μmol/L氯化镉处理细胞1小时,与对照组相比,c-Fos蛋白表达水平升高了1.6倍、2.2倍、2.4倍、3.3倍及2.8倍,而c-Myc蛋白表达水平为对照组的98.1%95.3%93.9%88.6%和89.6%。100μmol/L氯化镉染毒0min、15min、30min、60min、90min及120min,c-Fos蛋白表达水平为对照组的2.6倍、3.3倍、3.3倍、4.1倍和3.8倍,而c-Myc蛋白表达水平为对照组的96.6%、89.3%、92.1%、87.4%和88.7%。结论:12.5μmol/L~200μmol/L的氯化镉在离体情况下呈剂量依赖和时间依赖的方式诱发豚鼠肾上腺皮质细胞凋亡;12.5μmol/L~200μmol/L的氯化镉在离体情况下呈剂量依赖和时间依赖的方式诱导豚鼠肾上腺皮质中c-Fos蛋白表达升高,而对c-Myc有轻微的下调作用,提示氯化镉进入机体后以c-Fos蛋白构成的转录因子可能启动下游与凋亡有关的基因。……