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重组杆状病毒感染悬浮昆虫细胞感染策略优化及放大试验

靖志强;张佑红

  昆虫细胞—杆状病毒表达系统已经广泛应用于生物杀虫剂及重组蛋白的大规模生产。在昆虫细胞—杆状病毒表达系统中,采用低感染复数进行重组病毒的大规模生产是一个很好的选择,但感染策略中的感染复数(MOI)、感染时间(TOI)、细胞初始浓度(ICD)的相互关系还不是很清楚,而且相关报道也很少。本研究在摇瓶中利用正交实验探讨了MOI,TOI及ICD的相互作用关系以及对包涵体病毒(OV)和非包涵体(BV)病毒产量的影响。结果表明,感染复数对OV和BV产量有显著的影响;细胞初始浓度的影响次之,感染时间的影响较弱;最大BV病毒滴度为2.0×10~7TCID_(50)/mL,最大包涵体病毒的浓度为1.9×10~6OVs/mL。进一步,将在摇瓶中获得的最佳条件在气升式反应器进行扩大试验,获得最大病毒滴度为2.13×10~7TCID_(50)/mL,最大包涵体病毒的浓度为2.20×10~6OVs/mL。……