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一株具广谱抗植物病原真菌效果的枯草芽孢杆菌及其应用

贾宇;张树斌;王立安

  从玉米叶片上分离到一株生防细菌,通过菌落和菌体形态观察、生理生化测定及16SrDNA序列同源性分析,将该菌株鉴定为一种枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)(CGMCC No.1982)。该菌株表现广谱抗植物病原真菌活性,且拮抗活性对温度、pH及传代具稳定性。去除菌体后的菌株发酵液经50%饱和度的硫酸铵沉淀得到粗拮抗蛋白,该蛋白具有耐高温(100℃,10min),耐酸碱(pH值范围为5.0-9.0),对紫外线、胰蛋白酶部分敏感,对蛋白酶K、氯仿敏感等理化特性。采用氯化锂紫外线复合诱变处理,可提高其拮抗能力。经过4次诱变,得到的J4-1菌株,拮抗活性提高了64.5%,且具良好的遗传稳定性。可采用补料分批发酵工艺对该菌株进行大量培养,发酵液活菌数为(3.132±0.376)×10~(11)cfu/mL。采用灌根、喷施方法对菌液的防病效果进行了田间试验,结果表明:(1)生防菌液对温室大棚青椒枯萎病的平均防治效果化学农药的145.76%,对青椒白粉病的平均防效为达到化学农药的77.89%。(2)生防菌液对大棚黄瓜褐斑病防效达到化学农药的77.67%。(3)对番茄灰霉病的防治效果达到化学农药的65.35%;(4)对葡萄炭疽病的防效达到化学农药的99.28%;对葡萄褐斑病的防效达到化学农药的92.93%。急性毒理试验表明:该菌剂微毒性,为安全生放菌剂。相关研究内容已发表在《微生物学通报》,2009,36(3);《安徽农业科学,2009,37(4)及发明专利:一种枯草芽孢杆菌及其应用(ZL200710062503.1)。……