手机知网 App
24小时专家级知识服务
打 开
手机知网|搜索

壳寡糖诱导的NtSKP1基因的反义封闭烟草的产生

张付云;李伟;张瑛;孙秋颖;李研;杜昱光

  根据枯斑三生烟SKP1基因(NtSKP1)的序列,设计一对分别含有特定酶切位点的特异引物,以重组质粒pMD18-SKP1为模板,扩增目的基因(约473 bp)片段。将反向目的片段插入中间载体pHANNIBAL的内含子右侧,再经NotⅠ酶切回收约3443 bp的目的片段,插入到双元载体质粒pART27中,成功构建了含NtSKP1基因片段反向序列的植物表达载体pART27-skpla,其转录产物能减弱目的基因的表达.将pART27-skpla质粒导人根癌农杆菌LBA4404中并转化烟草叶片细胞,经选择分化培养,获得转基因烟草(图8)。……