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降脂益肝冲剂对非酒精性脂肪肝大鼠肝脏组织抵抗素mRNA表达的影响

赵和平;杨文慧

  目的:观察非酒精性脂肪肝大鼠模型中肝组织中抵抗素 mRNA 的表达情况,并观察降脂益肝冲剂对肝组织抵抗素 mRNA 表达的影响。方法:72只雄性 Wistar 大鼠随机分为正常对照组(N 组),模型对照组(M 组),药物干预组(D 组),每组24只,分别设8、13、 18周三个时相点,每个时点8只大鼠,相对应的组别为 N1、N2、N3,M1、M2、M3,D1、D2、 D3组。D1、D2、D3组分别于实验开始、第8周末和第13周末,给予降脂益肝冲剂1ml/100g, 以0.8g/ml 的浓度溶解灌胃,每日两次,分别持续8W,5W,5W。同时 M 组和 N 组分别给予等量的生活饮用水灌胃。检测大鼠体重、体长、肝脾湿重,并计算肝指数及肝湿重/脾湿重等体质指标;测定 ALT、AST、空腹血糖、血脂及肝组织脂质含量,铜染色法测定血清和肝组织 FFA 水平,放免法测定血清空腹胰岛素(FINS)和 TNF-α水平,计算胰岛素敏感指数 (ISI=ln-[1/(FINS×FBG)]);比色法测定血清和肝组织 GSH 含量,黄嘌呤氧化酶法测定血清和肝组织 SOD 活性;硫代巴比妥酸法测定血清和肝组织 MDA 含量;光镜下评估脂肪变性和炎症活动情况;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定肝组织抵抗素 mRNA 的表达。结果:1. 正常组大鼠肝小叶结构完整,各项生化指标均在正常范围;抵抗素 mRNA 表达微弱。2.8 周末,模型组大鼠出现了明显的脂质代谢紊乱,伴随高胰岛素血症和胰岛素抵抗;血清转氨酶水平较正常组明显升高,TNF-α水平升高;肝组织出现了轻到中度脂肪变,且无炎细胞浸润;肝脏抵抗素 mRNA 的表达较其对照组显著升高。用药组大鼠血清和肝组织各项指标均明显改善;肝脂变程度较模型组明显减轻;肝组织抵抗素 mRNA 表达显著降低(P<0.05)。 3.13周末,模型组大鼠胰岛素抵抗程度较前无明显进展:和正常组相比,血脂和肝脏脂质含量、血清 TNF-α含量、转氨酶水平明显升高;HDL-C 含量明显降低;肝组织出现中到重度脂肪变,炎症活动度计分明显高于正常组(P<0.01):肝组织抵抗素 mRNA 表达显著升高, 且与前期相比差异显著(P<0.01)。用药组大鼠血清和肝组织各项指标均明显改善;肝组织抵抗素 mRNA 表达显著降低(P<0.01);肝组织脂变程度及炎症活动度明显减轻(P<0.05, P<0.01)。4.18周末,模型组大鼠胰岛素抵抗程度较前仍无明显进展;和正常组相比,血脂和肝脏脂质含量、血清 TNF-α含量、转氨酶水平明显升高;HDL-C 含量明显降低;肝组织弥漫性脂肪变性及气球样变性,炎症活动度计分明显高于正常组(P<0.01);肝组织抵抗素 mRNA 表达继续显著升高,与前期相比差异显著(P<0.0 1)。用药组大鼠血清和肝组织各项指标均明显改善;肝组织抵抗素 mRNA 表达显著降低(P<0.01);肝组织脂变及气球样变程度明显减轻(P<0.01),炎症活动度也明显减轻(P<0.01)。5.相关性分析显示:模型组各时点肝脏抵抗素 mRNA 水平均与血清 TNF-α水平、肝脏炎症活动度计分呈正相关(P<0.01或 P<0.05)。而与 ISI 仅在8周末模型组呈负相关(P<0.01),第13,18周末二者无相关性。结论:1.正常大鼠肝脏可表达抵抗素,NAFLD 大鼠肝脏抵抗素基因表达上调,且随造模时间延长表达量显著增加;相关性分析提示抵抗素可能通过胰岛素抵抗触发 NASFL 的形成,通过对炎症因子的调控参与 NASH 的发生;并与 NAFLD 相互促进,形成恶性循环。2.JYC 对 NAFLD 具有良好的防治疗效果,其部分作用的发挥可能与下调肝脏抵抗素 mRNA 的表达有关。……