基础医学
利用CRISPR/Cas9系统建立斑马鱼Spag6基因敲除模型
2018-04-15
目的采用高效基因编辑系统CRISPR/Cas9对斑马鱼的精子相关抗原6(Spag6)基因进行编辑,建立Spag6基因敲除斑马鱼模型。方法针对斑马鱼Spag6基因,利用生物信息学选取靶位点,构建向导RNA(gRNA)表达载体并体外转录,将gRNA和Cas9mRNA混合物显微注射到斑马鱼单细胞期的受精卵中,24~48h提取基因组DNA,PCR扩增出目的片段,限制性酶切法初步检测基因打靶情况,最后进行测序分析确定编辑效果。结果取3个靶位点(S1、S2、S3)进行实验,选择gRNA浓度较高的S1和S3进行注射。限制性酶切及测序的结果显示S3已产生编辑效应。结论通过CRISPR/Cas9系统成功地获得Spag6基因编辑的突变体,为进一步探讨斑马鱼Spag6基因的体内功能奠定了基础。
领 域:
关键词:
格 式:
PDF原版;EPUB自适应版(需下载客户端)
0 15
下载全文(PDF文件/1108K)
华中科技大学学报(医学版)
2018年02期
相似文献
血液和心血管疾病研究的重要模式生物——斑马鱼
期刊
斑马鱼——一种可用于中药药效和毒性筛选的鱼类模型
期刊
沙门菌-斑马鱼感染模型用于自噬的研究
期刊
视黄酸缺乏对斑马鱼心脏房室分化的影响
期刊
ptges3a基因在斑马鱼早期胚胎发育过程中的表达
期刊
FLT4基因在斑马鱼早期发育过程中的表达
期刊
更多相似文献