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第一章 文献综述 1.1 蛋白质运输系统简介 1.2 细菌蛋白质的分泌和输出系统的发现 1.3 细菌蛋白质输出的新系统-Tat系统 1.3.1 Tat系统简介 1.3.2 Tat系统发现的证据 1.3.3 信号肽:双精氨酸信号肽 1.3.4 精氨酸信号肽与高级信号肽的区别 1.3.5 Tat、Sec和ΔpH三个输出系统 1.4 影响Tat转运系统的因素 1.5 Tat系统专一性 1.5.1 Tat系统的底物专一性 1.5.2 Tat系统的物种专一性 1.6 Tat系统的基因结构 1.7 依赖于Tat转运系统转运的蛋白质特点 1.8 大肠杆菌Tat系统的检测手段 1.8.1 荧光蛋白 1.8.2 生理指标 1.9 大肠杆菌与嗜热杆菌Tat系统研究 1.10 本研究的目的和意义
第二章 材料和方法 2.1 菌株和质粒 2.1.1 菌株 2.1.2 质粒 2.2 培养基和化学试剂 2.3 实验方法 2.3.1 大肠杆菌的培养及菌种保存 2.3.2 培养条件及其优化 2.3.3 质粒DNA的提取 2.3.4 琼脂糖凝胶电泳 2.3.5 DNA向受体菌的导入 2.3.6 SDS敏感度曲线的测定 2.3.7 UV诱变处理 2.3.8 NG诱变处理 2.3.9 EMS诱变处理 2.3.10 突变前后细胞形态观察 2.3.11 质粒DNA的消除 2.3.12 TMAO检验互补功能 2.3.13 本研究的技术路线
第三章 结果与分析 3.1 大肠杆菌Tat系统野生型和缺陷型的生理和生化检测 3.2 大肠杆菌Tat系统野生型和缺陷型在显微镜下的细胞形态 3.2.1 光学显微镜下的细胞形态 3.2.2 荧光显微镜下Tat系统菌株及其缺陷型的形态对比分析 3.3 大肠杆菌和嗜热杆菌Tat系统功能互补性检测 3.3.1 p8773和p8774质粒的提取 3.3.2 p8773,p8774转化大肠杆菌Tat系统系列缺陷型菌株后的SDS检测 3.4 大肠杆菌和嗜热杆菌Tat系统互补菌株的诱变筛选 3.3.1 典型转化子突变前在显微镜下的细胞形态检验 3.4.2 SDS筛选浓度的确定 3.4.3 UV的诱变 3.4.4 NG诱变和EMS诱变
第四章 总结与展望 4.1 总结 4.2 展望
参考文献
致谢