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畜牧与动物医学
镉对体外培养鸡脾淋巴细胞膜结构和功能的影响
镉可以通过各种途径进入机体,在体内蓄积,对肾、肝、脾、肺、心血管、睾丸等器官产生一系列损伤。本试验在镉致鸡脾脏淋巴细胞凋亡机理研究的基础上进一步以通过体外培养鸡脾脏淋巴细胞,在培养液中加入终浓度为10μmol/LCdCl_2进行染镉处理,通过对细胞培养液LDH的活性、细胞膜组分与含量以及膜抗氧化功能、膜ATPase活性、膜流动性、细胞内游离钙离子浓度([Ca~(2+)]i)和细胞CaM mRNA表达水平的检测,研究镉对鸡脾淋巴细胞膜结构和功能的影响,旨在探讨镉致膜毒性作用机理。研究结果表明: 1.通过对淋巴细胞膜分析,证实镉引起百分含量增加的蛋白区带有区带Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、IX,百分含量降低的蛋白区带有区带V、Ⅵ、Ⅶ;膜磷脂中磷脂酰胆碱(PC)和磷脂酰乙醇胺(PE)的百分含量减少,磷脂酰丝氨酸(PS)和鞘磷脂(SM)的百分含量增加;膜SA含量降低,提示镉引起细胞膜生物大分子结构破坏,使膜蛋白和膜磷脂发生氧化损伤,膜蛋白发生了交联。 2.通过对淋巴细胞膜抗氧化功能的检测,证实镉能够引起膜谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性降低,膜脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量升高,导致淋巴细胞膜氧化损伤,发生氧化胁迫,进而发挥其对禽类淋巴细胞膜的毒性作用。 3.通过对淋巴细胞膜ATPase活性、淋巴细胞膜微粘度与荧光偏振度、培养液乳酸脱氢酶(LDH)活性的检测,发现镉能够降低膜ATPase的活性和膜流动性,增加膜通透性。 4.通过用荧光法检测淋巴细胞内[Ca~(2+)]i和半定量RT-PCR法检测钙调蛋白(CaM)的mRNA表达水平,结果表明镉能使细胞内[Ca~(2+)]i增加,CaM mRNA表达水平降低,揭示镉能够引起鸡脾脏淋巴细胞钙稳态紊乱,导致细胞膜的功能发生紊乱。 本试验从亚细胞水平和分子水平阐明了镉对鸡脾脏淋巴细胞膜的毒性效应及机理,为阐明镉对细胞、组织脏器及整个机体的毒性作用机理提供了理论和试验依据。
机 构:
领 域:
关键词:
硕士论文
《东北农业大学》 2006年硕士论文

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