手机知网 App
24小时专家级知识服务
打 开
手机知网|搜索

ARV、REV与ALV三重RT-PCR检测方法的建立

毕研丽;王金良;郭广君;吕素芳;杨慧;宋峰;苗立中;沈志强

  根椐GenBank中已发表的禽呼肠孤病毒(ARV)、禽网状内皮增生病病毒(REV)、禽白血病病毒(ALV)等3种病毒基因组序列,设计了3对分别与ARV、REV和ALV某段基因序列互补的引物。在建立各病毒单项RT-PCR技术的基础上,优化三重RT-PCR反应条件,建立了3种病毒的三重RT-PCR技术。结果表明,用这3对引物对同一样品中的ARV、REV、ALV核酸模板进行三重RT-PCR扩增,可同时扩增ARV的247bp,ALV的675bp,REV的467bp的特异性片段,而对其他6种禽病病原的PCR扩增结果均为阴性。敏感性测定结果表明,该三重RT-PCR技术能检出10pg的ALV、1pg的ARV和10pg的REV模板。用42份临床病料对本研究多重RT-PCR技术和单项RT-PCR技术进行对比验证,结果显示,两者的总符合率为92%以上。表明建立的多重RT-PCR检测方法,具有特异、快速、准确的特点,可用于对这3种病毒的同时检测和鉴别诊断。……   
[关键词]:三重聚合酶链反应;禽呼肠孤病毒;禽网状内皮增生病病毒;禽白血病病毒
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《中国兽医学报2012年03期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)