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鸡骨、肝和肠硷性磷酸酶的提纯和性质

欧阳红生;汪玉松

  用正丁醇抽提、DEAE纤维素(DE—52)和Con·A—Sepharase 4B柱层析等方法从鸡的骨、肝和肠组织中提取碱性磷酸酶(ALP)。提纯倍数分别为41倍(骨)、391倍(肝)和130倍(肠)。将粗提的ALP进行聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳,骨、肝ALP均出现两条带,其分于量为154 000和353 000(骨),187 000和353 000(肝);肠ALP有3个组分,分子量为123 000、235 000和327 000。骨、肝、肠的ATP经DE—52柱层析均得到两个酶峰,其中总活性较大的峰(主峰)进行Con·A—Sepharose 4B柱层析后,其ALP对磷酸苯二钠的km值分别为0.532mM(骨)、0.452mM(肝)和0.472mM(肠)。骨、肝ALP对热敏感,而肠ALP则比较耐热,56℃作用9min,酶活性降低98.8%(骨)、95%(肝)和59.3%(肠)。尿素可抑制骨和肝ALP,肠ALP对尿素不大敏感。4 mol/L尿素对骨ALP活性抑制100%,对肝ALP 95%,对肠ALP仅为47%。2 mmol/L左旋咪唑能抑制骨ALP活性的57.1%、肝ALP的57.7%、肠ALP的15.7%。20 mmol/L L—苯丙氨酸能抑制肝ALP活性的12%、骨ALP的18.5%、肠ALP的57%。低浓度L—苯丙氨酸(1~15mmol/L)对骨ALP几乎没有抑制作用,而对肝ALP有一定抑制作用。上述结果表明,鸡的骨、肝和肠ALP可分为两型:一型为肠ALP,另一型为骨和肝ALP。……   
[关键词]:;;肝、肠;碱性磷酸酶;同工酶
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《兽医大学学报1988年02期