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雷公藤叶片DNA提取及RAPD反应体系建立

林光美;随粉粉;林楠;郑翔宇;侯长红

  筛选并建立雷公藤叶片基因组DNA的Random Amplified Polymorphic DNA技术最优反应体系。采用改良的CTAB法提取叶片总DNA,然后通过对RAPD反应体系中最主要的退火温度、引物浓度、dNTP浓度、DNA模板浓度以及TagDNA聚合酶浓度等5个因子逐个进行单因子优化。结果显示20μlPCR反应体系中,雷公藤叶片基因组DNARAPD最优反应体系为,最佳温度36℃,引物浓度为1.1μmol/L,dNTP浓度1.25mmol/L,DNA模板浓度3790ng/L,TagDNA聚合酶用量为5.625U/L。通过构建该雷公藤叶片基因组的RAPD优化体系,为接下去进一步的多样性分析、遗传图谱构建提供基础。……   
[关键词]:雷公藤;RAPD;DNA;反应体系
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《中国农学通报2010年01期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)