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犬流感病毒RT-LAMP快速检测方法的建立

高晓宇;曹荣峰;张桂红;李守军

  为了建立一种便捷、灵敏的犬流感病毒(CIV)检测技术,本研究根据CIV相对保守的M片段设计3对特异性引物,建立CIV的RT-LAMP检测方法,对反应体系中的MgSO4、Betaine、Bst DNA PoLymerase、dNTP、引物浓度等分别进行了优化,并进行敏感性和特异性试验。结果表明:所建立的反应体系在恒温水浴锅中作用45min即可得到其特有的阶梯状条带,而且对犬细小病毒、犬瘟病毒和犬副流感病毒的扩增结果均为阴性。该方法对CIV RNA的最小检测限为0.1pg,灵敏性高于一步RT-PCR方法。RT-LAMP和普通RT-PCR方法检测临床样品的符合率为93.02%。该方法为犬流感病毒的临床检测提供了一种简便、实用的方法,为基层检疫提供了方便。……   
[关键词]:犬流感病毒(CIV);逆转录环介导等温扩增;快速检测
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《中国预防兽医学报2010年01期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)