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党参DNA-AFLP分析体系建立及条件优化

苏强;杨静;王哲;高建平

  探讨影响党参(Codonopsis pilosula)扩增片断长度多态性(Amplified Fragment Length Polymor-phism,AFLP)的各种因素,建立并优化党参AFLP反应体系。以党参鲜嫩叶片为材料,采用改进的CTAB法提取基因组DNA,考察适合的酶切反应时间、对连接产物和预扩产物设置不同稀释倍数进行扩增,最后聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,银染检测。本研究建立了适用于党参的AFLP体系:300 ng的基因组DNA被限制性内切酶Mse I和EcoR I完全酶切,酶切条件为37°C 3 h,连接条件为16°C 12 h;连接产物1倍,预扩产物150倍稀释。扩增后,2对E+3/M+3引物组合共得到90条多态性条带,PAGE电泳条带清晰,稳定,分辨率高。本研究建立的反应体系适用于党参的DNA-AFLP分析研究。……   
[关键词]:党参;扩增片段长度多态性;CTAB法
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《药物生物技术2010年04期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)