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牛源无乳链球菌CAMP因子(cfb)的克隆及原核表达

王向柳;王长法;杨宏军;阿合买提·买买提;高运东;仲跻峰

  提取能产生CAMP反应的牛源无乳链球菌山东分离株的基因组DNA,PCR扩增CAMP因子基因,重组到pMD18-T载体中。测序结果表明,扩增片断含有768 bp的ORF,可编码含255个氨基酸的成熟蛋白,与已报道的无乳链球菌CAMP因子蛋白的氨基酸组成相比,第8位Tyr→Cys,第95位Pro→Ser,第126位Thr→Ala的3个氨基酸发生了点突变,同源性为98.4%。成功构建原核表达载体pET32a+/cfb,SDS-PAGE分析蛋白质表达水平,IPTG诱导后表达的融合蛋白分子量为48 kD,表达量占菌体总蛋白的52.7%。这为进一步研究其致病与免疫机理、疫苗设计提供了条件。……   
[关键词]:无乳链球菌;CAMP因子;克隆;表达
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《新疆农业科学2009年01期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)