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表达猪传染性胃肠炎病毒S基因的重组乳酸乳球菌的构建及免疫原性分析

唐丽杰;欧笛;葛俊伟;徐义刚;李一经;史达;夏春丽;郁茵

  根据猪传染性胃肠炎病毒纤突(S)蛋白的全基因序列及表达载体质粒的基因融合特点,设计一对引物,进行PCR扩增,获得含有TGEVS基因4个主要抗原位点的约2000bp的目的片段,将其与分泌表达的载体质粒pNZ8112进行连接,通过电击转化进入宿主菌乳酸乳球菌NZ9000细胞内,在乳链菌肽(Nisin)的诱导下进行表达,通过SDS-PAGE和Western blot分析,表明TGEVS蛋白在乳酸乳球菌中获得表达,所表达的TGEVS蛋白具有与TGE病毒一样的抗原特异性。间接免疫荧光试验表明重组菌表达蛋白定位于菌体表面。将表达TGEVS蛋白的重组乳酸乳球菌及空质粒菌株分别口服免疫BALB/c小鼠,收集粪便样品进行抗体检测,结果表明分泌型的重组菌pNZ8112-Sa/NZ9000免疫小鼠能够产生明显的抗TGEVsIgA抗体。……   
[关键词]:TGEVS蛋白;乳酸乳球菌;表面表达;免疫原性分析
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《微生物学报2007年02期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)