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甾醇酰基转移酶基因高表达对酵母菌麦角甾醇合成的影响

何秀萍;郭雪娜;张博润;谭华荣

  通过PCR扩增克隆到含酵母菌甾醇酰基转移酶基因ARE2编码序列和上游调控序列的DNA片段ARE21及仅含编码序列的DNA片段ARE22。分别以ARE2启动子 ,乙醇脱氢酶基因ADH1启动子和铜抗性基因CUP1启动子及ADH1终止子为调控元件构建了酵母菌表达质粒pHX2 ,pHXA2和pHXC2。表达质粒分别转化酿酒酵母单倍体菌株YS5 8和以前通过细胞杂交构建的麦角甾醇高产菌株YEH5 6。通过营养缺陷互补和铜抗性筛选到转化子 ,质粒上的ARE2基因在YS5 8和YEH5 6中都实现了活性表达 ,使细胞内甾醇酯化水平升高 ,并导致细胞麦角甾醇含量的提高。对转化菌株的培养条件进行了初步研究 ,在优化条件下 ,重组转化菌株YEH5 6 (pHX2 )、YEH5 6 (pHXA2 )和YEH5 6 (pHXC2 )的麦角甾醇含量分别是受体菌YEH5 6的 13、13和 14倍。……   
[关键词]:甾醇酰基转移酶;基因表达;麦角甾醇;酵母工程菌
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《微生物学报2004年01期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)