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中国木薯醇腈酶在汉逊酵母中的表达

张冬冬;雷白时;姜军坡;牛振东;邱并生;朱宝成

  α-醇腈酶(α-hydroxynitrilelyase,HNL)是手性醇腈化合物生物合成十分有用的工具,能够催化羰基化合物和HCN立体选择性的加工形成手性醇腈化合物。应用PCR扩增得到HNL基因,连接到pMD18-T中进行测序,然后通过EcoRⅠ和NotⅠ将其连接到汉逊酵母表达载体pHMOXGαA中。通过在含有4mg/mL的G418的YPD培养基上进行筛选获得阳性重组子,用0.5%的甲醇诱导96h。酶活测定和SDS-PAGE分析显示HNL在汉逊酵母NCYC495(leu1.1)中得到正确表达,每毫升发酵液中获得2.015U的醇腈酶。……   
[关键词]:中国木薯醇腈酶;汉逊酵母;25SrDNA;自主复制序列
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《微生物学通报2009年06期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)