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抗肉毒毒素A人源单链抗体在酵母细胞中的分泌表达

王慧;荫俊;侯晓军;邢洪光

  将特异肉毒抗毒素基因克隆入载体pPIC9k,G418抗性加压筛选阳性整合克隆,在毕赤酵母细胞GS115中进行分泌表达。获得了稳定分泌表达ScFv的工程菌,SDS-PAGE分析可见,目的蛋白分子量约为26kD,通过放大体积来探索重组抗毒素的诱导表达条件及纯化工艺,结果发现,1%甲醇诱导后72~84h,目的蛋白的表达达到高峰,占酵母培养上清中总蛋白的15%以上,经两步层析纯化,目的蛋白纯度可达95%。竞争活性测定结果表明,重组抗毒素在体外具有良好的活性,可竞争肉毒抗毒素马血清与毒素的特异结合。……   
[关键词]:人源单链抗体;分泌表达;纯化;毕赤酵母
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《微生物学通报2005年02期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)