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重组羧肽酶原B的复性方法研究

张晓彦;刘海峰;袁勤生

  构建的羧肽酶原B表达质粒在大肠杆菌中获得高表达。但目的蛋白是以包涵体的形式存在。为了获得活性羧肽酶B,必须对其包涵体进行变复性。首先利用稀释复性确定了羧肽酶原B复性的最佳缓冲液;在凝胶过滤复性中,研究了柱长和洗脱流速对羧肽酶原B复性效率的影响;另外对比了稀释复性、透析复性、凝胶层析复性和Ni2+亲合层析法等四种方法对羧肽酶原B的复性效果。结果发现,这4种方法的复性效果有以下顺序:凝胶过滤复性>稀释复性>Ni2+亲合层析>透析复性。……   
[关键词]:羧肽酶原B;包涵体;凝胶过滤;稀释;透析;Ni2+亲合层析
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《微生物学通报2005年02期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)