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大肠杆菌嘌呤核苷磷酸化酶基因的克隆与真核表达载体的构建

谢庆军;陆应麟;刘爽;王涛

  根据Genbank中大肠杆菌嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)基因的核苷酸序列,设计并合成了一对引物,以大肠杆菌基因组DNA为模板,进行PCR扩增,并将扩增产物定向连接到克隆、测序及真核表达载体PCDNA3中,进行酶切鉴定、测序及序列分析。结果表明PCR扩增出741bp大小的片段,通过酶切和序列分析证明含完整的PNP基因序列且基因插入方向正确,此序列与文献报道的PNP基因的同源性为99.7%。说明克隆的PNP基因与文献报道的基本一致,pcDNA3-PNP的构建成功为今后用其进行基因转染来研究PNP/Mep-dR自杀基因系统在肿瘤基因治疗中的应用打下了基础。……   
[关键词]:大肠杆菌嘌呤核苷磷酸化酶;自杀基因;分子克隆
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《生物技术通讯1999年04期