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结合通用引物快速简便鉴定阳性克隆的PCR方法

崔静;黄爱龙;张文露

  通用引物与载体多克隆位点两端序列互补,将目的片段构建入载体pGEM-T Easy中,利用载体通用引物M13F和M13R结合片段特异引物进行菌液PCR反应。用PCR产物电泳结果来筛选阳性克隆并鉴定目的片段插入方向,同时能有效对短插入片段重组子进行筛选与鉴定。最终以DNA测序结果来验证,与测序结果一致,显示通用引物PCR方法对阳性克隆的筛选和鉴定优于传统酶切和普通PCR鉴定方法,能够弥补传统方法的不足,且简便快速,可作为筛选和鉴定阳性克隆的有效手段。……   
[关键词]:通用引物;PCR;鉴定;插入方向;短插入片段
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《生物技术通报2008年03期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)