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硅对PCR过程的抑制作用研究

王玮;王海滨;李志信;过增元

  探讨不同氧化程度的硅材料对PCR扩增的抑制作用及其机理。将不同氧化程度的硅纳米颗粒加入PCR反应液中 ,使其与Taq酶、模板等充分接触 ,通过离心将硅纳米颗粒沉降在管壁上 ,取出上清或保留硅纳米颗粒上机扩增 ,扩增产物采用凝胶电泳法检测。结果表明 ,随着硅材料表面面积与PCR反应液体积之比的增大 ,核酸扩增效率将明显下降 ,并且在所研究的范围内 ,氧化程度高的硅材料对PCR过程抑制作用更强 ;通过对抑制作用机理进行初步的实验研究 ,表明硅材料对PCR反应液中的Taq酶的吸附是导致抑制现象产生的主要原因 ,而对模板的吸附影响较小 ;并且 ,反应管内是否保留硅材料对核酸扩增影响较小 ,硅材料没有明显的直接化学抑制作用。……   
[关键词]:;聚合酶链式反应;抑制作用
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《中国生物工程杂志2005年03期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)