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用酵母单杂交系统筛选与人ε-珠蛋白基因表达相关的基因

黄建;侯春晖;钱若兰

  人体胚胎型ε 珠蛋白基因 5′旁侧一个沉默子 (- 392~ - 177bp)对关闭该基因在胎儿期的表达起重要作用。DNaseI足迹法分析已表明在沉默子区内存在着一个明显的蛋白质因子结合位点 (- 2 78~ - 2 35bp)。为了筛选与沉默子DNA特异结合的蛋白质因子 ,将该保护区域的DNA序列作为靶序列 ,采用酵母单杂交系统对人胎儿肝cDNA表达文库进行筛选 ,并对获得的克隆进行序列分析。初步的结果表明 ,已分离到了人核糖体大亚基蛋白3(ribosomalproteinL3 ,RPL3)的全长cDNA克隆。体外凝胶电泳阻抑分析及竞争实验亦证明该蛋白质与沉默子DNA存在相互作用。提示RPL3可能通过与沉默子DNA的结合参与调节ε 珠蛋白基因的关闭……   
[关键词]:人ε-珠蛋白基因;酵母单杂交系统;沉默子;人核糖体大亚基蛋白3
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《生物化学与生物物理学报2001年02期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)