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单卵RT-PCR方法的优化和对牛卵母细胞中发育相关基因的表达研究

李彦欣;李世杰;赵定胜;赵春江;杜卫华;戴蕴平;李宁

  到目前为止 ,虽然许多动物如羊、牛、猪、鼠、兔、马、骡等均已克隆成功 ,但克隆技术普遍存在着克隆效率低、流产率高、畸胎、巨胎和死亡率高等问题 .为了较全面地探索其基因方面的原因 ,需要对大量的候选基因进行分析 .而利用传统的RT PCR方法从单个卵母细胞或胚胎中获得的RNA量不足以分析大量的基因 .为了解决这一问题 ,利用并优化了一套全新的扩增细胞中整体cDNA的方法 ,使微量材料进行大量的基因表达分析成为现实 .通过该方法研究了与发育相关的重要基因IL6、IFτ、CX4 3、PSMC3、oct4和DNMT1在牛卵母细胞中的表达 .IL6、IFτ和CX4 3的表达与前人报告的结果相同 ,而DNMT1和PSMC3在牛卵母细胞中表达情况此前未见报道 .……   
[关键词]:单卵RT-PCR方法;发育相关;基因表达
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《生物化学与生物物理进展2004年07期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)