手机知网 App
24小时专家级知识服务
打 开
手机知网|搜索

鼻咽癌细胞中p53相互作用蛋白质的分离和鉴定

胡巍;肖志强;陈主初;李建玲;张鹏飞;冯雪萍;易红;余艳辉;唐新科;刘清萍;梁宋平

  鼻咽癌中p5 3基因突变罕见 ,但绝大部分鼻咽癌中存在p5 3蛋白过表达 /聚集且功能失活 .然而 ,到目前为止p5 3蛋白失活的机制仍然不清楚 .为揭示鼻咽癌中p5 3蛋白功能失活的机制 ,采用免疫共沉淀技术分别富集鼻咽癌细胞系HNE1和HNE2的p5 3结合蛋白 ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)对免疫沉淀复合物进行分离 ,从胶中切取p5 3结合蛋白条带 ,胶内酶解后进行电喷雾串联质谱 (LC ESI MS/MS)分析 ,得到相应的肽序列标签 (peptidesequencetags ,PST) ,通过搜索数据库在鼻咽癌细胞系中鉴定了 9个p5 3结合蛋白 .分别是热休克蛋白 70 (HSP70 )家族成员GRP 78和GRP 75、HSP90家族成员GRP 94、核纤层蛋白A/C (LaminA/C)、α actinin 4、Ezrin/Cytovillin、DNA复制准许因子 /MCM3蛋白 (DNAreplicationlicensingfactor/minichromosomemaintenance 3protein ,MCM3)、CD98/ 4F2heavychain和蛋白激酶C (PKC) .并用免疫共沉淀和蛋白质印迹分析技术对HNE1细胞蛋白条带 3鉴定的p5 3相互作用蛋白之一HSP78进行了验证 .首次在鼻咽癌细胞中鉴定了 9个p5 3结合蛋白 ,为阐明鼻咽癌中p5 3蛋白聚集及失活的机制提供了重要依据和线索 .……   
[关键词]:p53;鼻咽癌;免疫共沉淀;液相色谱电喷雾串联质谱;相互作用蛋白;蛋白质印迹
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《生物化学与生物物理进展2004年07期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)