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‘蜂蜜罐’枣遗传转化条件的优化及Bt基因的导入

张燕征;张梦洋;李继东;谭彬;王腾飞;郑先波;叶霞;冯建灿

  为建立‘蜂蜜罐’枣高效遗传转化体系,以‘蜂蜜罐’枣胚培苗上胚轴和子叶为外植体进行转化,研究了不同菌液浓度、侵染时间、共培养时间、AS(乙酰丁香酮)浓度和侵染方式对gus(β-葡糖醛酸糖苷酶)基因瞬时表达率的影响。结果表明,当菌液OD_(600)值为0.5,真空辅助侵染10 min,共培养3 d,上胚轴和子叶外植体的共培养培养基中分别添加20和10 mg·L~(-1)乙酰丁香酮时,其gus瞬时表达率均最高,为最佳遗传转化体系。利用已优化的遗传转化体系进行Bt基因转化,共获得24个PCR(聚合酶链式反应)检测呈阳性的再生芽;对PCR检测呈阳性的不定芽进行伸长培养和不定根诱导,最终获得完整转基因植株。本研究初步获得了转Bt(苏云金芽孢杆菌)基因的枣植株,为通过转基因手段进行枣抗虫新种质选育提供可能。……   
[关键词]:‘蜂蜜罐’枣;上胚轴;子叶;gus瞬时表达率;Bt基因
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《河南农业大学学报2018年01期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)